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FITC-Dextran，綠色熒光標(biāo)記葡聚糖，F(xiàn)ITC標(biāo)記葡聚糖用于血管通透性評(píng)價(jià)的示蹤研究

一、基本信息

中文名：FITC-葡聚糖 / 綠色熒光標(biāo)記葡聚糖

英文名：FITC-Dextran

別稱：熒光素標(biāo)記葡聚糖、熒光素異硫氰酸酯葡聚糖、Fluorescein-Dextran

化學(xué)組成：FITC（熒光素異硫氰酸酯）標(biāo)記的葡聚糖（Dextran，一種可溶性多糖）

FITC-Dextran 是將綠色熒光染料 FITC（Fluorescein Isothiocyanate）通過(guò)化學(xué)方式與葡聚糖分子上的羥基或氨基進(jìn)行共價(jià)連接制備而成的熒光探針，具有良好的水溶性、生物相容性和強(qiáng)烈綠色熒光發(fā)射信號(hào)，廣泛用于細(xì)胞生物學(xué)、分子追蹤、血管滲透性評(píng)估等研究領(lǐng)域。

二、光學(xué)性質(zhì)

激發(fā)波長(zhǎng)（λ_ex）：約 490 nm

發(fā)射波長(zhǎng)（λ_em）：約 520–530 nm

發(fā)射顏色：明亮的綠色熒光

量子產(chǎn)率：高，約在0.9左右

熒光穩(wěn)定性：良好，但對(duì)光照較敏感，需避光保存

FITC 屬于常用的綠色熒光染料，與多種激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀和熒光成像設(shè)備兼容。

三、物化屬性

組成：葡聚糖骨架 + FITC染料基團(tuán)

分子量：可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇，常見(jiàn)有 4 kDa、10 kDa、20 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa、500 kDa 等不同規(guī)格

溶解性：*易溶于水、PBS、細(xì)胞培養(yǎng)液

外觀：淡黃綠色至黃綠色粉末

儲(chǔ)存條件：干燥、避光、2–8°C保存，溶液需冷凍保存（-20°C）避免反復(fù)凍融

不同分子量決定其擴(kuò)散性和細(xì)胞穿透性，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中可根據(jù)用途選擇合適規(guī)格。

四、合成方法簡(jiǎn)述

活化染料：FITC具有異硫氰酸基團(tuán)（–N=C=S），可與葡聚糖或氨基修飾葡聚糖的–OH 或 –NH?基團(tuán)反應(yīng)。

反應(yīng)條件：一般在碳酸鹽緩沖液中（pH 9.0）進(jìn)行，F(xiàn)ITC溶解于DMSO中緩慢加入葡聚糖溶液中。

共價(jià)偶聯(lián)：異硫氰酸基團(tuán)與羥基（或氨基）形成穩(wěn)定的硫代脲或氨基脲鍵。

純化：反應(yīng)后需透析（使用3.5–10 kDa MWCO膜）以去除未反應(yīng)的游離FITC。

凍干保存：透析液冷凍干燥后得到純化的FITC-Dextran產(chǎn)品。

商業(yè)品通常為高純度制備，標(biāo)記度可控，用戶可根據(jù)標(biāo)記密度選擇不同規(guī)格產(chǎn)品。

五、主要應(yīng)用方向

細(xì)胞攝取與胞吞研究
FITC-Dextran可用于觀察細(xì)胞對(duì)不同分子量大分子的攝取能力，尤其適用于吞噬細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞）的吞噬行為分析。

血管滲透性測(cè)定
注射不同分子量的FITC-Dextran后，通過(guò)熒光成像觀察其在組織中擴(kuò)散情況，是經(jīng)典的評(píng)估血腦屏障、腫瘤血管滲透性等實(shí)驗(yàn)手段。

組織間隙擴(kuò)散與分子通透性研究
利用FITC-Dextran作為示蹤分子研究在組織、器官或體液環(huán)境中的滲透和分布行為。

微流控系統(tǒng)示蹤
在芯片、膠體系統(tǒng)中，F(xiàn)ITC-Dextran可用作液流可視化追蹤分子，用于觀察流場(chǎng)分布。

細(xì)胞共聚焦顯微成像
配合共聚焦顯微鏡進(jìn)行3D結(jié)構(gòu)或胞內(nèi)追蹤，如細(xì)胞內(nèi)囊泡路徑、溶酶體/內(nèi)體標(biāo)記等。

腸道通透性與屏障功能研究
在小鼠或大鼠灌胃FITC-Dextran后檢測(cè)血漿熒光強(qiáng)度，評(píng)估腸道上皮通透性，是腸漏實(shí)驗(yàn)的常規(guī)指標(biāo)。

六、優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)

綠色熒光信號(hào)清晰，與DAPI等藍(lán)色染料、TRITC等紅色染料可多色搭配；

分子量可控，便于研究不同尺寸大分子的穿透和分布；

水溶性極好，不需有機(jī)溶劑輔助；

無(wú)毒、惰性強(qiáng)，生物兼容性良好，適用于細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；

可凍干保存，便于長(zhǎng)期儲(chǔ)存和使用。

七、代表性文獻(xiàn)與研究示例

Wong KH et al. Use of FITC-Dextran as a Permeability Tracer in Gut Epithelium Studies. J Pharm Sci. 2012;101(11):4171–4180.
→ 應(yīng)用于評(píng)估腸道屏障完整性。

Kang JH et al. Visualization of Blood-Brain Barrier Disruption Using FITC-Dextran in Mouse Models. Neurosci Lett. 2015;605:81–86.
→ 小鼠腦血管通透性研究。

Lopez CA et al. Size-dependent endocytosis of FITC-Dextran by macrophages for uptake mechanism analysis. Biomacromolecules. 2020;21(3):1452–1463.
→ 巨噬細(xì)胞吞噬路徑研究。

Lehner T et al. FITC-Dextran diffusion in hydrogels and tissues for imaging-based molecular transport analysis. Acta Biomater. 2019;96:327–336.
→ 組織工程材料滲透性能評(píng)估。

八、使用建議與注意事項(xiàng)

配制溶液建議使用無(wú)菌PBS或HEPES緩沖液；

使用過(guò)程中應(yīng)避光操作，防止FITC熒光衰減；

多色染料實(shí)驗(yàn)中注意熒光通道分離，避免交叉干擾；

配制后溶液不建議長(zhǎng)期室溫保存，可小分量?jī)龃妫?/p>

不同分子量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較大，建議預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化條件。

總結(jié)

FITC-Dextran是一種綠色熒光標(biāo)記的葡聚糖復(fù)合物，結(jié)合了葡聚糖良好的生物相容性與FITC優(yōu)良的熒光性質(zhì)，在細(xì)胞攝取、組織通透性、微流控成像等生物醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛應(yīng)用價(jià)值。其多種分子量規(guī)格和高靈敏度信號(hào)為分子示蹤、屏障功能評(píng)估及藥物釋放機(jī)制探索提供了可靠工具，是生命科學(xué)領(lǐng)域常用的熒光探針材料之一。

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