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產(chǎn)品名稱：Cy5-Vimentin， 花菁素Cy5標(biāo)記波形蛋白
一、合成方法
1. 合成路線
步驟：
波形蛋白的預(yù)處理：
通過重組表達或細(xì)胞裂解液提取波形蛋白，確保其天然構(gòu)象。
Cy5染料的活化：
將Cy5-NH?與琥珀酰亞胺酯（NHS ester）反應(yīng)，生成活性酯。
標(biāo)記反應(yīng)：
活性酯化的Cy5與波形蛋白的氨基反應(yīng)，形成酰胺鍵。
關(guān)鍵點：
反應(yīng)需在低溫（4℃）和中性pH（pH 7.4）下進行，避免波形蛋白變性。
使用過量Cy5染料（摩爾比10:1）提高標(biāo)記效率。
2. 純化與表征
純化：
通過凝膠過濾（如Sephadex G-25）去除未反應(yīng)的Cy5和副產(chǎn)物。
表征：
SDS-PAGE：檢測波形蛋白的分子量是否符合預(yù)期。
熒光光譜：驗證Cy5的激發(fā)和發(fā)射波長是否符合標(biāo)準(zhǔn)。
質(zhì)譜（MS）：確認(rèn)Cy5與波形蛋白的連接。
溫馨提示：僅用于科研，不能用于人體實驗！wyh
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